Цитологія і генетика 2022, том 56, № 1, 22-38
Cytology and Genetics , том , № , , doi: https://www.doi.org/

Виявлення та кількісне визначення мікотоксиногенних грибів з використанням методу ПЛР

Буслик Т.В., Росаловський В.П., Салига Ю.Т.

  • Інститут біології тварин НААН, вул. В. Стуса, 38, Львів, 79034, Україна

Одним з основних чинників зниження якості сільськогосподарської продукції є забруднення плісневими грибами, які здатні продукувати мікотоксини, що несе загрозу здоров’ю як тварин так і людини. У сучасних умовах підвищеної уваги до безпеки кормів питання своєчасного виявлення їх контамінації мікотоксинами та мікотоксинпродукуючими грибами є особливо актуальними. В огляді охарактеризовано сучасний стан проблеми забруднення мікотоксинами та мікотоксиногенними грибами сільськогосподарської продукції в Україні та світі. Описано шляхи впливу на здоров’я тварин найпоширеніших мікотоксинів, а саме – афлатоксинів, фумонізинів, охратоксинів, трихотеценів та зеараленону. Проаналізовано можливості і перспективи застосування полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) для якісного та кількісного виявлення мікотоксинпродукуючих грибів та для можливості прогнозування утворення мікотоксинів окремими штамами. Оцінено цільові регіони геному грибів, які можуть бути потенційними маркерами для їх видової ідентифікації та визначення хемотипу грибів. Основну увагу приділено методу ПЛР з електрофоретичною детекцією продуктів ампліфікації та ПЛР з детекцією у режимі реального часу (Real-Time ПЛР) з використанням технологій на основі інтеркалюючого барвника SYBR Green та флуоресцетних олігонуклеотидних зондів TaqMan. Розглянуто ряд ПЛР-тест систем для виявлення мікотоксиногенних цвілевих грибів, з використанням наборів праймерів, які спрямовані на структурні та регуляторні гени, що беруть участь у біосинтезі афлатоксинів (omt-1, nor1, ver1), фумонізинів (fum1, fum13), трихоценів (tri1, tri3, tri5, tri6, tri12, tri13), зеараленону (PKS4, PKS13, ZEB1, ZEB2) та охратоксину (pks, ОТАnps). Враховуючи розвиток сучасних молекулярно-генетичних методів обговорено можливості використання молекулярних методів, які включають аналіз ДНК-цільових областей для диференціації видів Fusarium, Aspergillus, Penicillium.

Ключові слова: мікотоксини, контамінація, гени, ПЛР

Цитологія і генетика
2022, том 56, № 1, 22-38

Current Issue
Cytology and Genetics
, том , № , ,
doi:

Повний текст та додаткові матеріали

Цитована література