Цитологія і генетика 2008, том 42, № 2, 10-15
Cytology and Genetics , том , № , , doi: https://www.doi.org/

Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кднк варіабельних генів імуноглобулінів миші

Павлова М.В., Гільчук П.В., Похоленко Я.О., Ніколаєв Ю.С., Кордюм В.А.

Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b.

Ключові слова: комбинаторная библиотека кДНК, фаговый дисплей, ScFv’s E. coli, rhIFN-β1b

Цитологія і генетика
2008, том 42, № 2, 10-15

Current Issue
Cytology and Genetics
, том , № , ,
doi:

Повний текст та додаткові матеріали

У вільному доступі: PDF  

Цитована література