Філадельфійська хромосома є результатом взаємної транслокації між 9 і 22 хромосомами і є чітким маркером декількох типів мієлопроліферативних розладів. Така транслокація породжує різні типи злиття генів bcr та abl. Ці злиття відрізняються наявністю або відсутністю певних типів доменів BCR та молекулярною масою відповідних химерних білків. BCR-ABLp230 асоціюється з хронічним нейтрофільним лейкозом, BCR-ABLp210 – з хронічним мієлолейкозом. BCR-ABLp190 – з гострим лімфобластним лейкозом. Домен гомології плекстрину BCR присутній у p210 і відсутній у p190 типу злитого білка. У цій роботі ми показали, що білок BCR колокалізується з актином та кортактином на периферії клітин клітин K562. Цей білок також утворював скупчення колокалізації з клатрином та контактином і знаходився в точках розгалуження актину. Це було підтверджено мікроскопією STED із надвисокою роздільною здатністю та звичайною конфокальною мікроскопією живих клітин HEK 293T. Конфокальна мікроскопія в реальному часі також виявила відносно велику структуру в цитоплазмі, де спостерігалося динамічне сполучення BCR, клатрину та актину. Це сильно нагадує комплекс Гольджі, оскільки мережа транс-Гольджі є типовим місцем сортування та збирання пухирців, покритих клатрином. Отримані нами дані вказують на те, що BCR в тандемі з кортактином може відігравати важливу роль у динамічних перебудовах актину та мембрани, які впливають на опосередкований клатрином ендоцитоз та везикулярний транспорт Гольджі. Порушення його функції через аномальну активність тирозинкінази ABL може сприяти фенотипу раку.
Ключові слова: BCR-ABL, клатрин-опосередкований ендоцитоз, ХМЛ, кортактин, розгалуження актину

Повний текст та додаткові матеріали
Цитована література
1. Aigouy, B. and Mirouse, V., ScientiFig: a tool to build publication-ready scientific figures, Nat. Methods, 2013, vol. 10, p. 1048. https://doi.org/10.1038/nmeth.2692
2. Antonenko, S.V., Kravchuk, I.V., and Telegeev, G.D., Interaction of Bcl-Abl oncoprotein with the Glg1 protein in K562 cells: its role in the pathogenesis of chronic myeloid leukemia, Cytol. Genet., 2020. https://doi.org/10.3103/S0095452720010028
3. Bard, F. and Malhotra, V., The formation of TGN-to-plasma-membrane transport carriers, Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 2006, vol. 22, pp. 439–455. https://doi.org/10.1146/annurev.cellbio.21.012704.133126
4. Birnboim, H.C. and Doly, J., A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA, Nucleic Acids Res., 1979, vol. 7, pp. 1513–1523. https://doi.org/10.1093/nar/7.6.1513
5. Bolte, S. and Cordelieres, F.P., A guided tour into subcellular colocalization analysis in light microscopy, J. Microsc., 2006, vol. 224, pp. 213–232. https://doi.org/10.1111/j.1365-2818.2006.01706.x
6. Cao, H., Orth, J.D., Chen, J., et al., Cortactin is a component of clathrin-coated pits and participates in receptor-mediated endocytosis, Mol. Cell Biol., 2003, vol. 23, pp. 2162–2170. https://doi.org/10.1128/MCB.23.6.2162-2170.2003
7. Cao, H., Weller, S., Orth, J.D., et al., Actin and Arf1-dependent recruitment of a cortactin–dynamin complex to the Golgi regulates post-Golgi transport, Nat. Cell Biol., 2005, vol. 7, pp. 483–492. https://doi.org/10.1038/ncb1246
8. Chen, J.L., Lacomis, L., Erdjument-Bromage, H., et al., Cytosol-derived proteins are sufficient for Arp2/3 recruitment and ARF/coatomer-dependent actin polymerization on Golgi membranes, FEBS Lett., 2004, vol. 566, pp. 281–286. https://doi.org/10.1016/j.febslet. 2004.04.061
9. Chen, L., Wang, Z.-W., Zhu, J., and Zhan, X., Roles of cortactin, an actin polymerization mediator, in cell endocytosis, Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai), 2006, vol. 38, pp. 95–103. https://doi.org/10.1111/j.1745-7270.2006.00141.x
10. Chen, P.H., Yao, H., and Huang, L.J.S., Cytokine receptor endocytosis: new kinase activity-dependent and -independent roles of PI3K, Front. Endocrinol. (Lausanne), 2017, vol. 8. https://doi.org/10.3389/fendo.2017.00078
11. Cho, Y.J., Cunnick, J.M., Yi, S.-.J., et al., Abr and Bcr, two homologous Rac GTPase-activating proteins, control multiple cellular functions of murine macrophages, Mol. Cell Biol., 2007, vol. 27, pp. 899–911. https://doi.org/10.1128/mcb.00756-06
12. Daboussi, L., Costaguta, G., and Payne, G.S., Phosphoinositide-mediated clathrin adaptor progression at the trans-Golgi network, Nat. Cell Biol., 2012, vol. 14, pp. 239–248. https://doi.org/10.1038/ncb2427
13. Dey, N., Blanc-Feraud, L., Zimmer, C., et al., Richardson–Lucy algorithm with total variation regularization for 3D confocal microscope deconvolution, Microsc. Res. Tech., 2006, vol. 69, pp. 260–266. https://doi.org/10.1002/jemt.20294
14. Emilia, G., Luppi, M., Marasca, R., and Torelli, G., Relationship between BCR/ABL fusion proteins and leukemia phenotype, Blood, 1997, vol. 89, pp. 3889–3889. https://doi.org/10.1182/blood.V89.10.3889.3889_3889_3889
15. Gordon, M.Y., Dowding, C.R., Riley, G.P., et al., Altered adhesive interactions with marrow stroma of haematopoietic progenitor cells in chronic myeloid leukaemia, Nature, 1988, vol. 328, pp. 342–344. https://doi.org/10.1038/328342a0
16. Groffen, J., Stephenson, J.R., Heisterkamp, N., et al., Philadelphia chromosomal breakpoints are clustered within a limited region, bcr, on chromosome 22, Cell, 1984, vol. 36, pp. 93–99. https://doi.org/10.1016/0092-8674 (84)90077-1
17. Gu, C., Yaddanapudi, S., Weins, A., et al., Direct dynamin–actin interactions regulate the actin cytoskeleton, EMBO J., 2010, vol. 29, pp. 3593–35606. https://doi.org/10.1038/emboj.2010.249
18. Holst, M.R., Vidal-Quadras, M., Larsson, E., et al., Clathrin-independent endocytosis suppresses cancer cell blebbing and invasion, Cell Rep., 2017, vol. 20, pp. 1893–1905. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2017.08.006
19. Huang, S. and Wang, Y., Golgi structure formation, function, and post-translational modifications in mammalian cells, F1000Research, 2017, vol. 6, p. 2050. https://doi.org/10.12688/f1000research.11900.1
20. Kirkbride, K.C., Hong, N.H., French, C.L., et al., Regulation of late endosomal/lysosomal maturation and trafficking by cortactin affects Golgi morphology, Cytoskeleton, 2012, vol. 69, pp. 625–643. https://doi.org/10.1002/cm.21051
21. Kirshner, H., Aguet, F., Sage, D., and Unser, M., 3-D PSF fitting for fluorescence microscopy: implementation and localization application, J. Microsc., 2013, vol. 249, pp. 13–25. https://doi.org/10.1111/j.1365-2818.2012.03675.x
22. Lemmon, M.A., Pleckstrin homology domains: not just for phosphoinositides, Biochem. Soc. Trans., 2004, vol. 32, pp. 707–711. https://doi.org/10.1042/BST0320707
23. Lemmon, M.A. and Ferguson, K.M., Signal-dependent membrane targeting by pleckstrin homology (PH) domains, Biochem. J., 2000, vol. 350, p. 1. https://doi.org/10.1042/0264-6021:3500001
24. Lemmon, M.A., Ferguson, K.M., and Abrams, C.S., Pleckstrin homology domains and the cytoskeleton, FEBS Lett., 2002, vol. 513, pp. 71–76.
25. Manders, E.M.M., Verbeek, F.J., and Aten, J.A., Measurement of co-localization of objects in dual-colour confocal images, J. Microsc., 1993, vol. 169, pp. 375–382. https://doi.org/10.1111/j.1365-2818.1993.tb03313.x
26. Mayinger, P., Regulation of Golgi function via phosphoinositide lipids, Semin. Cell Dev. Biol., 2009, vol., 20, pp. 793– 800. https://doi.org/10.1016/j.semcdb.2009.03.016
27. Miroshnychenko, D., Dubrovska, A., Maliuta, S., et al., Novel role of pleckstrin homology domain of the Bcr-Abl protein: analysis of protein-protein and protein-lipid interactions, Exp. Cell Res., 2010, vol. 316, pp. 530–542. https://doi.org/10.1016/j.yexcr.2009.11.014
28. Narayanan, A.S., Reyes, S.B., Um, K., et al., The Rac-GAP Bcr is a novel regulator of the Par complex that controls cell polarity, Mol. Biol. Cell, 2013, vol. 24, pp. 3857–3868. https://doi.org/10.1091/mbc.E13-06-0333
29. Sage, D., Donati, L., Soulez, F., et al., DeconvolutionLab2: an open-source software for deconvolution microscopy, Methods, 2017, vol. 115, pp. 28–41. https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2016.12.015
30. Sauer, M.-L., Kollars, B., Geraets, R., and Sutton, F., Sequential CaCl2, polyethylene glycol precipitation for RNase-free plasmid DNA isolation, Anal. Biochem., 2008, vol. 380, pp. 310–314. https://doi.org/10.1016/j.ab.2008.05.044
31. Schindelin, J., Arganda-Carreras, I., Frise, E., et al., Fiji: an open source platform for biological image analysis, Nat. Methods, 2012, vol. 9, pp. 676–682. https://doi.org/10.1038/nmeth.2019.Fiji
32. Shannon, C.E., Communication in the presence of noise, Proc. IEEE, 1998, vol. 86, pp. 447–457. https://doi.org/10.1109/JPROC.1998.659497
33. Steen, W., Principles of Optics, Born, M. and Wolf, E., Eds., 7th ed. (expanded), Cambridge: Cambridge University Press, 1999, ISBN 0-521-64222-1. Opt Laser Technol 32:385. https://doi.org/10.1016/S0030-3992(00)00061-X
34. Underhill-Day, N., Pierce, A, Thompson, S.E., et al., Role of the C-terminal actin binding domain in BCR/ABL-mediated survival and drug resistance, Br. J. Haematol., 2006, vol. 132, pp. 774–783. https://doi.org/10.1111/j.1365-2141.2005.05949.x
35. Van Etten, R.A., The molecular pathogenesis of the Philadelphia-positive leukemias: implications for diagnosis and therapy, Cancer Treat. Res., 1993, pp. 295–325.
36. Van Etten, R.A., Aberrant cytokine signaling in leukemia, Oncogene, 2007, vol. 26, pp. 6738–6749. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210758
37. Waugh, M.G., The Great Escape: how phosphatidylinositol 4-kinases and PI4P promote vesicle exit from the Golgi (and drive cancer), Biochem. J., 2019, vol. 476, pp. 2321–2346. https://doi.org/10.1042/BCJ20180622
38. Weaver, A.M., Cortactin in tumor invasiveness, Cancer Lett., 2008, vol. 265, pp. 157–166. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2008.02.066
39. Whittaker, E.T., XVIII. On the functions which are represented by the expansions of the interpolation—theory, Proc. R. Soc. Edinburgh, 1915, vol. 35, pp. 181–194. https://doi.org/10.1017/S0370164600017806
40. Yan, J., Wen, W., Xu, W., et al.,) Structure of the split PH domain and distinct lipid-binding properties of the PH-PDZ supramodule of alpha-syntrophin, EMBO J., 2005, vol. 24, pp. 3985–3995. https://doi.org/10.1038/sj.emboj.7600858
41. Yarar, D., Waterman-Storer, C.M., and Schmid, S.L., A dynamic actin cytoskeleton functions at multiple stages of clathrin-mediated endocytosis, Mol. Biol. Cell, 2005, vol. 16, pp. 964–975. https://doi.org/10.1091/mbc.E04-09-0774
42. Zhu, J., Zhou, K., Hao, J.-J., et al., Regulation of cortactin/dynamin interaction by actin polymerization during the fission of clathrin-coated pits, J. Cell Sci., 2005, vol. 118, pp. 807–817. https://doi.org/10.1242/jcs.01668