Для изучения роли ацетилирования α-тубулина в реализации аутофагии, индуцированной различными стрессовыми факторами, с помощью Вестерн-блот анализа определены уровни этой посттрансляционной модификации у растений Arabidopsis thaliana, подвергшихся воздействию таких абиотических факторов, как солевой и осмотический стресс, голодание или ультрафиолет-В. Показано существенное повышение уровней ацетилированного α-тубулина при развитии аутофагии, которые снижались при синергическом влиянии стрессовых воздействий и ингибитора аутофагии Е-64. Для изучения тканеспецифичности данной модификации был также проведен иммуногистохимический анализ ацетилирования α-тубулина в проростках A. thaliana. В результате этих экспериментов удалось обнаружить, что индуцируемое стрессом ацетилирование α-тубулина имеет тканеспецифический характер, в частности, проявляясь наиболее выраженно в молодых и меристематических тканях, а также в тканях корней (корневом чехлике, эпидермисе и перицикле). Полученные результаты могут служить подтверждением регуляторной роли ацетилирования α-тубулина в реализации аутофагии как адаптивной реакции на воздействие стрессовых факторов у растений.
РЕЗЮМЕ. Було проведено Вестерн-блот аналіз ацетилювання α-тубуліну і визначено рівні цієї посттрансляційної модифікації у рослин Arabidopsis thaliana, що зазнавали впливу різних абіотичних факторів, таких, як сольовий та осмотичний стреси, голодування і ультрафіолет-В. Було показано суттєве підвищення рівнів модифікованого α-тубуліну при розвитку стрес-індукованої аутофагії, що знижувалися за умов синергічного впливу абіотичних факторів та інгібітору аутофагії Е-64. В результаті проведеного імуногістохімічного аналізу ацетилювання α-тубуліну було виявлено, що дана модифікація, яка індукується стресом, має тканиноспецифічний характер, зокрема, найбільш виражено проявляється у молодих та меристематичних тканинах, а також у тканинах коренів (кореневому чохлику, епідермісі і перициклі). Отримані результати можуть слугувати підтвердженням регуляторної ролі ацетилювання α-тубуліну у реалізації аутофагії як відповіді на дію абіотичних стресів у рослин.
Ключові слова: α-тубулин; ацетилирование; аутофагия; Arabidopsis thaliana; голодание, ультрафиолет-В, солевой стресс, осмотический стресс; иммуногистохимический анализ