Головна Контакти Архів   Тематика журналу Підписка До уваги авторів Редколегія Дестопна версія

Isolating and confirming the Mudr­inserted flanking sequences of maize

Yang W.F., Tian Y.H., Wang T.T., Wang R.N., Tao Y.S.

Реферат статті 

РЕЗЮМЕ. MuDR проявляет наивысшую транспозиционную активность и частоту инерционного мутагенеза в семействе Mutator (Mu). Если изолировать вставленные специальные фланкирующие последовательности (MuDRFs), это будет критически важным для использования элемент­опосредованных мутантов. Система MuDR­TAIL­PCR была создана и оптимизирована с использованием комбинации MuDR­TIR­вложенных специфических праймеров и 12 случайных вырожденных праймеров, модифицированной реакционной системы и методики и мутантных ДНК­матриц 87 генотипов из семейств M₂ или M_{2: 3}, созданных в результате скрещивания линии W22::Mu (родительский донор активных MuDR) из популяции UniformMu с линией Zong31 (родительский реципиент). В настоящей работе MuDR­TAIL­PCR получили 129 различных MuDRFs, что составляет 86,6 % общих мутант­специфических полос в агарозном геле. Кроме того, подтверждено аутентичность амплификации незарезервированных фланкирующих последовательностей, которые составляли 65,12 % общих MuDRFs, а 88,00 % незарезервированных MuDRFs встраивались в гены. Эти результаты свидетельствуют о том, что созданная нами система MuDR­TAIL­PCR может быть использована для специфического выделения MuDRFs.

MuDR проявляє найвищу транспозиційну активність та частоту інcерційного мутагенезу в родині Mutator (Mu). Якщо ізолювати вставлені специфічні флангові послідовності (MuDRFs), це буде критично важливим для використання елемент­опосередкованих мутантів. Система MuDR­TAIL­PCR була створена і оптимізована з використанням комбінації MuDR­TIR­вкладених специфічних праймерів та 12 випадкових вироджених праймерів, модифікованої реакційної системи і методики та мутантних ДНК­матриць 87 генотипів з родин M₂ або M_2:3, створених внаслідок схрещування лінії W22::Mu (батьківський донор активних MuDR) з популяції UniformMu з лінією Zong31 (батьківський реципієнт). В даній роботі MuDR­TAIL­PCR набули 129 різних MuDRFs, що складає 86,6 % загальних мутант­специфічних смуг в агарозному гелі. Крім того, підтверджено аутентичність ампліфікації незарезервованих фланкуючих послідовностей. Ампліфіковані незарезервовані фланкуючі послідовності становили 65,12 % загальних MuDRFs, а 88,00 % незарезервованих MuDRFs вбудовувались в гени. Ці результати свідчать, що створена нами система MuDR­TAIL­PCR може бути використана для специфічного виділення MuDRFs.

Ключові слова: MuDR­TAIL­PCR, MuDR transposon, MuDR­insertion mutant library, Zea mays L.

Цитологія і генетика 2017, том 51, № 2, C. 89-90

Hebei Sub­center of Chinese National Maize Improverment Center, North China Key Laboratory for Crop Germplasm Resources of Education Ministry, College of Agronomy, Agricultural University of Hebei, Baoding, 071000 China

E-mail: yshtao2015 hotmail.com

Yang W.F., Tian Y.H., Wang T.T., Wang R.N., Tao Y.S. Isolating and confirming the Mudr­inserted flanking sequences of maize, Цитологія і генетика., 2017, том 51, № 2, C. 89-90.

В "Cytology and Genetics". Якщо тільки можливо, цитуйте статтю по нашій англомовній версії:
W. F. Yang, Y. H. Tian, T. T. Wang, R. N. Wang, Y. S. Tao Isolating and confirming the MuDR-inserted flanking sequences of maize, Cytol Genet., 2017, vol. 51, no. 2, pp. 142–148
DOI: 10.3103/S0095452717020074