|
|||
|
![]()
In English Export citations UNIMARC BibTeX RIS Screening and genetic identification of acidic and neutral proteaseproducing yeasts strains by 26S rRNA gene sequencingРеферат статті РЕЗЮМЕ. Протеолитические ферменты (протеазы), особенно продуцируемые микроорганизмами, играют очень важную роль в индустрии благодаря своему раз-нообразному применению. Принимая во внимание значительное многообразие микроорганизмов в природе, всегда существуют хорошие шансы открытия более пригодных протеаз для промышленного использования при поиске новых микроорганизмов в местах их локального распространения. В настоящей работе 94 изолята дрожжей выделены из различных природных ареалов района Abha, Саудовская Аравия, для изучения продукции и активности внеклеточных протеаз. Среди них 23 изолята (24,46 %) показали протеазную активность с помощью теста на гидролиз казеина. Из них выделены пять изолятов (21,74 %), которые идентифицированы как лучшие продуценты протеаз на основе самых прозрачных зон вокруг колоний. Сравнение и филогенетический анализ последовательности домена D1/D2 генов 26S рРНК с опубликованным в GenBank последовательностями позволили идентифицировать изоляты как Rhodotorula mucilaginosa KKU-M12c, Cryptococcus albidus KKU-M13c, Pichia membranifaciens KKU-M18c, Hanseniaspora uvarum KKU-M19c и Candida californica KKU-M20c. Влияние различных значений рН (4,0–9,0) на продукцию и активность протеаз было изучено с использованием 0,5 % (w/v) казеина в качестве субстрата для определения оптимальных значений рН для продукции внеклеточных протеаз у дрожжей. Ферментативную активность оценивали качественно и количественно. Полученные результаты свидетельствуют, что все изученные дрожжи выделяют протеазы при всех изученных уровнях рН, кроме pH 9,0. Это означает, что ни один из пяти видов дрожжей не является продуцентом щелоч-ных протеаз. Максимальную протеазную активность (187 U/ml) показано для штамма H. uvarum KKU-M19c при pH 6.0 (исключительно). Это означает, что штамм продуцирует только нейтральную протеазу. Другие четыре изолята дрожжей, R. mucila-ginosa KKU-M12c, C. albidus KKU-M13c, P. membranifaciens KKU-M18c и C. californica KKU-M20c, продуцировали как кисле (при pH 4,0), так и нейтральные (при pH 6,0 и 7,0) протеазы. Определено, что штамм C. californica KKU-M20c был наилучшим продуцентом кислых и нейтральных протеаз (138 U/ml при pH 4,0 и 185 U/ml при pH 7,0). Эта работа является первым сообщением об открытии и выделении локальных мощных дрожжей в районе Abha, Саудовская Аравия, продуцирующие кислые и нейтральные протеазы. РЕЗЮМЕ. Протеолітичні ферменти (протеази), особливо ті, що продукуються мікроорганізмами, відіграють дуже важливу роль в індустрії завдяки широкому їх застосуванню. Беручи до уваги значне різноманіття мікроорганізмів в природі, завжди існують хороші шанси відкриття більш придатних протеаз для промислового застосування при пошуку нових мікроорганізмів в місцях їх локального розповсюдження. В даній роботі 94 ізоляти дріжджів були виділені з різних природних ареалів району Abha, Саудівська Аравія, для вивчення продукції та активності по-заклітинних протеаз. Серед них 23 ізоляти (24,46 %) показали протеазну активність за допомогою тес-ту на гідроліз казеїну. З них виділено 5 ізолятів (21,74 %), які були ідентифіковані як найкращі продуценти протеаз на основі найбільших прозорих зон навколо колоній. Порівняння та філогенетичний аналіз в нашій роботі послідовності домену D1/D2 генів 26S рРНК з опублікованими в GenBank послідовностями дозволили ідентифікувати ізоляти як Rhodotorula mucilaginosa KKU-M12c, Cryptococcus albidus KKU-M13c, Pichia membranifaciens KKU-M18c, Hanseniaspora uvarum KKU-M19c та Candida californica KKU-M20c. Вплив різних значень рН (4,0–9,0) на продукцію та активність протеаз було вивчено з використанням 0,5 % (w/v) казеїну як субстрата для визначення оптимальних значень рН для продукції позаклітинних протеаз у дріжджів. Ферментативну активність було оцінено якісно та кількісно. Отримані результати свідчать, що всі досліджені дріжджі виділяють протеази на всіх рівнях рН, крім pH 9,0. Це означає, що жоден з п’яти видів дріжджів не є продуцентом лужних протеаз. Максимальну протезну активність (187 U/ml) показано для штаму H. uvarum KKU-M19c при pH 6. (виключно). Це означає, що штам продукує тільки нейтральну протеазу. Інші чотири ізоляти дріжджів, R. mucilaginosa KKU-M12c, C. albidus KKU-M13c, P. membranifaciens KKU-M18c та C. californica KKU-M20c, продукували як кислі (при pH 4,0), так і нейтральні (при pH 6,0 та 7,0) протеази. Визначено, що штам C. californica KKU-M20c був найкращим продуцентом кислих та нейтральних протеаз (138 U/ml при pH 4,0 та 185 U/ml при pH 7,0). Ця робота є першим повідомленням про відкриття та виділення локальних потужних дріжджів в районі Abha, Саудівська Аравія, що продукують кислі та нейтральні протеази. Ключові слова: yeast isolation; 26S rDNA D1/D2 region; acidic and neutral protease enzymes; pH optimization
Цитологія і генетика 2017, том 51, № 3, C. 82-84
E-mail: hesham_egypt5 |
|
|||
Coded & Designed by Volodymyr Duplij | Modified 27.09.23 |