Головна Контакти Архів   Тематика журналу Підписка До уваги авторів Редколегія Дестопна версія

Lox-dependent gene expression in transgenic plants obtained via Agrobacterium-mediated transformation

Shcherbak N., Kishchenko O., Sakhno L., Komarnytsky I., Kuchuk M.

Оригінальна работа 

РЕЗЮМЕ. Проанализирована способность lox-сайтов Cre/lox системы рекомбинации бактериофага Р1 влиять на экспрессию трансгенов при расположении этой последовательности непосредственно возле правого бордера (RB) перед кодирующей последовательностью гена. Нативная и мутированная последовательность lox-сайта были размещены в векторах для трансформации возле гена bar и проведена генетическая трансформация растений с помощью агробактерии и биолистическим методом. Lox-опосредованная экспрессия гена bar, обусловливающая устойчивость растений к фосфинотрицину, наблюдалась только у растений, которые получены с помощью агробактериальной трансформации. Методом РТ-ПЦР анализа подтверждено, что в трансгенных растениях, устойчивых к фосфинотрицину, происходит транскрипция гена bar. Сконструирован вектор, в котором ген gus и предшествующий ему lox-сайт размещены вблизи правого бордера, и проведена трансформация табака этим вектором. Экспрессия гена gus задетектирована в листьях трансгенных растений. Векторы, у которых последовательность lox-сайта предшествует гену bar возле правого бордера (RB-lox-bar), успешно использованы для получения устойчивых к фосфинотрицину трансгенных растений таких видов, как Beta vulgaris, Brassica napus, Lactuca sativa и Solanum tuberosum. Наши результаты подтверждают возможность использования последовательности lox-сайта возле правого бордера для контроля экспрессии гена bar в трансгенных растениях.

Ключові слова: сайт, промоторы, трансгенная экспрессия, устойчивые к гербицидам растения
айт, промотори, трансгенна експресія, стійкі до гербіцидів рослини
site, promoter element, transgene expression, herbicide resistant crops

Цитологія і генетика 2013, том 47, № 3, C. 21-32

Institute of Cell Biology and Genetic Engineering NAS of Ukraine, Kyiv

Shcherbak N., Kishchenko O., Sakhno L., Komarnytsky I., Kuchuk M. Lox-dependent gene expression in transgenic plants obtained via Agrobacterium-mediated transformation, Цитологія і генетика., 2013, том 47, № 3, C. 21-32.

В "Cytology and Genetics". Якщо тільки можливо, цитуйте статтю по нашій англомовній версії:
N. Shcherbak, O. Kishchenko, L. Sakhno, I. Komarnytsky, M. Kuchuk Lox-dependent gene expression in transgenic plants obtained via Agrobacterium-mediated transformation, Cytol Genet., 2013, vol. 47, no. 3, pp. 145-155
DOI: 10.3103/S0095452713030079