Из иммунной и неиммунной комбинаторных библиотек кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мыши получена панель одноцепочечных антител (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) против рекомбинантного интерферона β1b человека (rhIFN-β1b), которые были экспрессированы в клетках Escherichia coli. Для изолированных из иммунной библиотеки продуцентов показана разница в уровнях продукции ScFv’s в периплазму и среду для культивирования, а также стабильность экспрессии при пересевах и хранении. После секвенирования целевой ДНК было проведено множественное выравнивание и структурный анализ последовательностей ScFv’s с разной первичной структурой, в результате чего были выявлены существенные отличия как в антиген-связывающих (CDR), так и в каркасных (FR) участках их вариабельных доменов. Методами ELISA и вестерн-блоттинга показана специфичность взаимодействия полученных из иммунной библиотеки ScFv’s как с нативным, так и с денатурированным rhIFN-β1b, а также их стабильность при хранении. Для каждого представителя панели ScFv’s были определены константы аффинности, которые находились в диапазоне от 1,9610 -8 до 1,6910 - 9 М.
Ключові слова: библиотека кДНК, ScFv’s, Escherichia coli, rhIFN-β1b, специфичность, аффинность
