ISSN 0564-3783  



Головна
Контакти
Архів  
Тематика журналу
Підписка
До уваги авторів
Редколегія
Мобільна версія


In English

Export citations
UNIMARC
BibTeX
RIS





Multiplex PCR assay for detection of human somatotropin and interferon alpha2b genes in plant material

Gerasymenko I.M., Mazur M.G., Sheludko Y.V., Kuchuk N.V.

Оригінальна работа 




РЕЗЮМЕ. Использование трансгенных растений для производства физиологически активных белков человека требует особых мер предосторожности, поскольку непредвиденное попадание таких трансгенов в нецелевые виды и сорта растений может угрожать здоровью людей. Создание сортов растений, накапливающих фармацевтически ценные белки, должно сопровождаться разработкой методов детекции для контроля поведения трансгена. В представленной работе описан протокол мультиплексной ПЦР для обнаружения двух генов человека (кодирующих гормон роста и интерферон α2b), которые могут быть успешно экспрессированы в растениях. Пара праймеров, которая разработана для детекции нуклеотидной последовательности, кодирующей гормон роста человека, позволяет амплифицировать фрагменты разной длины, соответствующие полноразмерному гену гену соматотропина в геноме человека и безынтронной кодирующей последовательности, которую обычно используют для трансформации растений. Применение этой пары праймеров можно рекомендовать для распознавания ложноположительных результатов, связанных с загрязнением растительных образцов человеческой ДНК. Такой контроль может быть полезен также для ПЦР анализа в ходе создания трансгенных растений, несущих гены человека.

РЕЗЮМЕ. Використання трансгенних рослин для виробництва фізіологічно активних білків людини вимагає особливих запобіжних заходів, оскільки непередбачене потрапляння таких трансгенів у нецільові види й сорти рослин може загрожувати здоров'ю людей. Створення сортів рослин, які накопичують фармацевтично цінні білки, повинне супроводжуватися розробкою методів детекції для контролю поведінки трансгена. У представленій роботі описано протокол мультиплексної ПЛР для виявлення двох генів людини (що кодують гормон росту й інтерферон α2b), які можуть бути успішно експресовані в рослинах. Пара праймерів, розроблена для детекції нуклеотидної послідовності, яка кодує гормон росту людини, дозволяє ампліфікувати фрагменти різної довжини, що відповідають повному гену соматотропину в геномі людини й безінтронній послідовності, що кодує гормон росту, яку зазавичай використовують для трансформації рослин. Застосування цієї пари праймерів можна рекомендувати для розпізнавання хибнопозитивних результатів, пов'язаних із забрудненням рослинних зразків людською ДНК. Такий контроль може бути корисним також для ПЛР аналізу в ході створення трансгенних рослин, які несуть гени людини.

Ключові слова: genetically modified plants, human growth hormone, interferon, multiplex PCR, somatotropin,
мультиплексная ПЦР, трансгенные растения, гормон роста человека, интерферон, соматотропин,
мультиплексна ПЛР, трансгенні рослини, гормон росту людини, інтерферон, соматотропні

Цитологія і генетика 2015, том 49, № 3, C. 3-8

Institute of Cell Biology and Genetic Engineering NAS of Ukraine, Kyiv

E-mail: i-gerasimenko ukr.net

Gerasymenko I.M., Mazur M.G., Sheludko Y.V., Kuchuk N.V. Multiplex PCR assay for detection of human somatotropin and interferon alpha2b genes in plant material, Цитологія і генетика., 2015, том 49, № 3, C. 3-8.




Copyright© ICBGE 2002-2021 Coded & Designed by Volodymyr Duplij Modified 21.10.21