ISSN 0564-3783  



Головна
Контакти
Архів  
Тематика журналу
Підписка
До уваги авторів
Редколегія
Мобільна версія


In English

Export citations
UNIMARC
BibTeX
RIS





Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека

Павлова М.В., Николаев Ю.С., Иродов Д.М., Окунев О.В., Кордюм В.А., Гильчук П.В.

Оригінальна работа 


[Free Full Text (pdf)]Article Free Full Text (pdf)  

Из иммунной и неиммунной комбинаторных библиотек кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мыши получена панель одноцепочечных антител (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) против рекомбинантного интерферона β1b человека (rhIFN-β1b), которые были экспрессированы в клетках Escherichia coli. Для изолированных из иммунной библиотеки продуцентов показана разница в уровнях продукции ScFv’s в периплазму и среду для культивирования, а также стабильность экспрессии при пересевах и хранении. После секвенирования целевой ДНК было проведено множественное выравнивание и структурный анализ последовательностей ScFv’s с разной первичной структурой, в результате чего были выявлены существенные отличия как в антиген-связывающих (CDR), так и в каркасных (FR) участках их вариабельных доменов. Методами ELISA и вестерн-блоттинга показана специфичность взаимодействия полученных из иммунной библиотеки ScFv’s как с нативным, так и с денатурированным rhIFN-β1b, а также их стабильность при хранении. Для каждого представителя панели ScFv’s были определены константы аффинности, которые находились в диапазоне от 1,9610 -8 до 1,6910 - 9 М.

Ключові слова: библиотека кДНК, ScFv’s, Escherichia coli, rhIFN-β1b, специфичность, аффинность

Цитологія і генетика 2008, том 42, № 4, C. 3-11

  • Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко, Украина
  • Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, Киев

E-mail: mailto:gilchuk ukr.net

Павлова М.В., Николаев Ю.С., Иродов Д.М., Окунев О.В., Кордюм В.А., Гильчук П.В. Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека, Цитологія і генетика., 2008, том 42, № 4, C. 3-11.




Copyright© ICBGE 2002-2021 Coded & Designed by Volodymyr Duplij Modified 24.07.21