Цитологія і генетика 2014, том 48, № 2, 3-11
Cytology and Genetics 2014, том 48, № 2, 69–75, doi: https://www.doi.org/10.3103/S0095452714020078

Получение трансгенных линий сахарной свеклы, экспрессирующих гены устойчивости к насекомым-вредителям сry1C и сry2A

Литвин Д.И., Сивура В.В., Курило В.В., Оленева В.Д., Емец А.И., Блюм Я.Б.

  • ДУ «Институт пищевой биотехнологии и геномики Национальной академии наук Украины», Киев
  • Киевский национальный университет им. Тараса Шевченко

Существенным ограничением урожайности сахарной свеклы является пагубное воздействие на нее насекомых-вредителей. Одной из перспективных стратегий обеспечения устойчивости растений выступает интеграция в растительный геном генов сry-белков Bacillus thuringiensis. Целью настоящей работы была генетическая трансформация сахарной свеклы линии ММ1/2 векторными конструкциями pRD400-cry1C и pRD400-cry2A, несущими гены cry1C и cry2A соответственно. В результате оптимизации протокола трансформации и прямой регенерации из листовых дисков с использованием 1 мг/л бензиламинопурина, а также 0,25 мг/л бензиламинопурина и 0,1 мг/л индолил-масляной кислоты получены трансгенные линии сахарной свеклы, несущие гены cry1C и cry2A. С помощью ПЦР-анализа подтверждена интеграция cry2A и cry1C в их геном, а с помощью метода ПЦР с обратной транс-крипцией установлено наличие экспрессии указанных генов в этих линиях.

РЕЗЮМЕ. Істотним обмеженням врожайності цукрових буряків є згубний вплив на цю культуру комах-шкідників. Однією з перспективних стратегій забезпечення стійкості рослин є інтеграція в рослинний геном генів сry-білків Bacillus thuringiensis. Метою даної роботи була генетична трансформація цукрового буряку лінії ММ1/2 векторними конструкціями pRD400-cry1C і pRD400-cry2A, що несуть гени cry1C та cry2A відповідно. У результаті оптимізації протоколу трансформації та прямої регенерації з листових дисків із використанням 1 мг/л бензиламінопурину, а також 0,25 мг/л бензиламінопурину та 0,1 мг/л ін-доліл-масляної кислоти отримано трансгенні лінії цукрового буряку, що несуть гени cry1C і cry2A. За допомогою ПЛР-аналізу підтверджено інтеграцію cry2A і cry1C в їхній геном, а за допомогою ПЛР зі зворотною транскрипцією встановлено наявність експресії даних генів в цих лініях.

Ключові слова: Beta vulgaris, cry-гены, генетическая трансформация.

Цитологія і генетика
2014, том 48, № 2, 3-11

Current Issue
Cytology and Genetics
2014, том 48, № 2, 69–75,
doi: 10.3103/S0095452714020078

Повний текст та додаткові матеріали

У вільному доступі: PDF  

Цитована література