Cytology and Genetics ,
том ,
№ , ,
doi: https://www.doi.org/
Одним из подходов к клонированию уникальных генов является использование инсерционного мутагенеза с помощью транспозонов. Объектом исследования был Orychophragmus violaceus (L.) O.E.Schulz – дикий вид из семейства крестоцветных, представляющий интерес для практической селекции как донор улучшенного состава растительного масла. Для генетической трансформации использовали конструкцию, которая включает селективный NPT II-ген, репортерный GUS-ген, структурный BAR-ген, находящийся в границах неавтономного транспозона dSpm, и Spm-транспозазу (SpmTPase) кукурузы. GUS-ген не активен, так как отделен от 35S промотора инсерцией dSpm элемента и становится функциональным только после dSpm транспозиции. Трансгенные растения Orychophragmus violaceus (L.) O.E.Schulz были получены с помощью методов прямой (обработка ПЭГ в присутствии ДНК) трансформации мезофильных протопластов, а также Agrobacterium tumefaciens-опосредованной трансформации корневых эксплантов. Встраивание в геном всех перечисленных генов и явление транспозиции подтверждено с помощью гистохимического анализа GUS-активности и ПЦР-анализа. Относительная эффективность трансформации при использовании протопластов составила 5,8 %.
Ключові слова: